超純水對于HPLC的影響
液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一種有效可靠的技術,目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLCzui常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。
顆粒物可以損壞柱塞桿和密封圈以及進樣閥。顆粒物也能堵塞色譜柱并且熔化它,這會導致系統(tǒng)壓力增大。顆粒物還會表現(xiàn)為另一種固相,可能改變樣品的組分。
有機物會影響色譜峰的分離度和積分、也可能會導致鬼峰、還可能改變固定相的選測性以及影響色譜基線。
離子濃度的改變會影響分離結果,部分能吸收UV的離子會對峰產生影響。某些有腐蝕性離子的還會降低高壓輸液泵等配件的使用壽命。
膠體會不可逆的吸附在固定相上面,影響柱的分離效果。
微生物會堵塞色譜柱,其代謝產物會增加有機物,顆粒物等污染物。
瓶裝純凈水和蒸餾水是目前部分HPLC分析中使用的純凈水,由于瓶裝純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是超純水,水中仍含有少量離子和有機物等雜質,用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱,也影響HPLC走出平坦的基線。
瓶裝純凈水的純化工藝,通常包括吸附、過濾、反滲透等。對顆粒物,有機物的去除效果較好,但對微量離子及有機物的去除卻不能滿足高靈敏度的HPLC實驗之需求,并且,由于其包裝通常多為PVC瓶,透氧率高,同時存在一定的化學溶出量,從而污染瓶中的純凈水,尤其是保存一段時間后,水質下降更多,因此表現(xiàn)在HPLC色譜圖上,雖無特定吸收峰,但基線存在較嚴重的干擾。
蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水??煞忠淮魏投啻握麴s水。水經過一次蒸餾,不揮發(fā)的組分殘留在容器中被除去,揮發(fā)的組分進入蒸餾水的初始餾分中,通常只收集餾分的中間部分,約占60%,要得到更純的水,可在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液,除去有機物和二氧化碳;加入非揮發(fā)性的酸(硫酸或磷酸),使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。通過對雙蒸水進行HPLC檢測時發(fā)現(xiàn),254nm和214nm在22-27分鐘時都出現(xiàn)較強的吸收峰,這表明有疏水性較強的有機物污染,其原因應是蒸餾過程的共沸現(xiàn)象導致了某些揮發(fā)性有機物去除不*。
上海烜晟推出的UPA、UPB、UPC、UPD系列超純水機綜合了反滲透、離子交換、活性炭吸附、膜過濾、超濾及紫外光氧化等多種純化工藝,產水電導率達到18.2MΩ•cm, 產水水質超過國標一級水標準且穩(wěn)定可測,超純水即取即用,不會因儲存引入污染,水質有保證,較之使用瓶裝純凈水或蒸餾水,更能滿足用戶高精度儀器分析的需要。
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